تهیه مواد جایگزین سرم جنین گاو و بررسی اثر آن ها بر رشد دودمان های سلولی هیبریدومایی و میزان ترشح آنتی بادی های منوکلونال

نویسندگان

دکتر رضا گلستانی

golestani r دانشگاه تربیت مدرس دکتر سید محمد مؤذنی

moazzeni s. m دانشگاه تربـیت مـدرسسازمان اصلی تایید شده: دانشگاه تربیت مدرس (tarbiat modares university)سازمان های دیگر: مـرکز تحقیقـات سازمـان انتقـال خـون ایـران و شـرکت پاالیـش و پـژوهش خون دکتر علی اکبر پورفتح اله

puorfathollah a.a دانشگاه تربیت مدرسسازمان اصلی تایید شده: دانشگاه تربیت مدرس (tarbiat modares university)سازمان های دیگر: مرکز تحقیقات سازمان انتقال خون ایران لطیف حمیدپور

hamidpour l مرکز تحقیقات سازمان انتقال خون ایرانسازمان اصلی تایید شده: دانشگاه تربیت مدرس (tarbiat modares university)سازمان های دیگر: مرکز تحقیقات سازمان انتقال خون ایران دکتر مجتبی شرفی

چکیده

چکید ه سابقه و هدف دست یابی به منابع جایگزین سرم جنین گاو به عنوان ماده مغذی کشت سلول به علت کمبود این نوع سرم و نیازهای متفاوت سلول های مختلف همواره مورد بررسی می باشد . این مطالعه به تهیه مواد مغذی جانشین سرم جنین گاو و بررسی اثر آن ها بر رشد سلول ها و ترشح آنتی بادی های منوکلونال توسط دودمان های سلولی هیبریدومایی پرداخته است. مواد وروش ها مطالعه انجام شده از نوع تجربی بود. پلاکت های تاریخ گذشته با گروه های مختلف به منظور استخراج عوامل رشد موجود در آن ها مورد استفاده قرار گرفتند. پلاسما با گروه ab نیز به سرم تبدیل شد و اثر آن با محیط های حاوی سرم جنین گاو، هیپوگزانتین ـ تیمیدین (ht) و1640 rpmi مورد مقایسه قرار گرفت. شاخص های رشد مورد ارزیابی شامل شمارش ابتدایی سلول ها، confluency (میزان پر شدن چاهک ) روزانه و تیتراسیون آنتی بادی های منوکلونال آنتی a و آنتی b گروه های خونی بودند. آنالیز آماری شامل آزمون t تک نمونه ای، برازش منحنی رگرسیون چندگانه لگاریتمی و تحلیل عاملی منحنی های رشد توسط نرم افزار 12 spss انجام شد. یافته ها چهار ماده مغـذی سـرم ab انسانـی (ab) ، سرم جنین گاو (fcs) ، عصاره پلاکتی انسان (plt) و مخلوط ab و plt (abp) جهت رشد سلول های هیبریدومایی موشی تولیدکننده آنتی سرم های گروه های خونی a و b مورد ارزیابی قرار گرفتند و با شاخص های رشد در محیط پایه 1640 rpmi مقایسه شدند. بیشترین اثر مثبت بر رشد به ترتیب نزولی عبارت بود از: 1- 5% abp ، 2- 10% fcs ، 3- 10% abp ، 4- 5% ab ، 5- 10% ab ، 6- 5% plt ، 7- 20% abp ، 8- 10% plt ، 9- 20% plt ، 10- هیپوگزانتین ـ تیمیدین و تنها 20% ab مانع رشد گردید. تیتر آنتی a و آنتی b ایجاد شده توسط هیبریدوم ها در مقادیر 5 و 10 درصد از plt ، ab و مخلوط این دو (abp) نسبت به fcs 5 تا 10 درصد به ترتیب نزولی به صورت زیر به دست آمد: 1- 5% plt ، 2- 10% plt ، 5% abp ،10% abp ، 10% ab ، 3- 5% ab . نتیجه گیری به طور کلی fcs دارای بیشترین اثر در شیب تکثیر و مرگ و کمترین اثر در مرحله ثبات منحنی رشد سلول ها می باشد لذا جهت تکثیر سلول ها در شمارش پایین مناسب به نظر می رسد. سرم ab ، عصاره پلاکتی و مخلوط این دو در مقادیر مناسب دارای شیب کمتر تکثیر نسبت به fcs بوده و باعث طولانی شدن مرحله ثبات و کاهش شیب مرگ می گردند (این مواد در غلظت های بالا باعث مرگ سلول ها می شوند). بنابراین ممکن است جهت کشت سلول در سیستم های ممتد کشت مناسب باشند. کلمات کلیدی: سرم انسانی، کشت سلول، کینتیک رشد، گروه های خونی، تحلیل عاملی

برای دانلود باید عضویت طلایی داشته باشید

برای دانلود متن کامل این مقاله و بیش از 32 میلیون مقاله دیگر ابتدا ثبت نام کنید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

تهیه مواد جایگزین سرم جنین گاو و بررسی اثر آن‌ها بر رشد دودمان‌های سلولی هیبریدومایی و میزان ترشح آنتی‌بادی‌های منوکلونال

چکید ه سابقه و هدف دست‌یابی به منابع جایگزین سرم جنین گاو به عنوان ماده مغذی کشت سلول به علت کمبود این نوع سرم و نیازهای متفاوت سلول‌های مختلف همواره مورد بررسی می باشد . این مطالعه به تهیه مواد مغذی جانشین سرم جنین گاو و بررسی اثر آن‌ها بر رشد سلول‌ها و ترشح آنتی‌بادی‌های منوکلونال توسط دودمان‌های سلولی هیبریدومایی پرداخته‌است. مواد وروش‌ها مطالعه انجام شده از نوع تجربی بود. پلاکت‌های تاریخ گذ...

متن کامل

آنتی بادی های منوکلونال

تکنولوژی تهیه مقادیر زیاد آنتی بادی خاص یک شاخص آنتی ژنی موجب دگرگونی و تحول عظیم در علوم پزشکی گردید. آنتی بادی های منوکلونال اختصاصاً به یک اپی توپ خاص متصل می گردند و به همین خاطر از نظر ژنتیکی و متابولیسم سلولی همگن هستند و همه از یک کلاس معین ایمونوگلوبینی با خصوصیات شیمیایی و فیزیکی یکسان و با جزئیات کامل شبیه به هم هستند. امروزه با تولید نسل جدید آنتی بادی های منوکلونال نوترکیب با استفاده...

متن کامل

اثر آنتی بادی های منوکلونال ضد پلاسمینوژن انسانی بر فعال شدن گلو-پلاسمینوژن انسانی بوسیله فعال کننده های پلاسمینوژن

Background: Human plasminogen is a plasma glycoprotein synthesized mainly in the liver. Conversion of plasminogen to plasmin by plasminogen activators is a key event in the fibrinolytic system. In this study, we investigated the effects of two anti-human plasminogen monoclonal antibodies, A1D12 and MC2B8 on Glu-plasminogen activation in presence of u-PA, t-PA and streptokinase. Methods: Produci...

متن کامل

مروری بر تولید و کاربرد آنتی بادی های منوکلونال تک زنجیره ای: scFv

Abstract Background: Since the development of monoclonal antibodies by hybridoma technology the use of antibodies in targeted therapy has been considered. ScFv (single-chain variable fragment) is a small fragment of monoclonal antibody which binds to its target, especially. The goal of this study, is introducing of scFv, its production pathways as well as its diagnostic and therapeutic appl...

متن کامل

بررسی اثر آنتی بادی های منوکلونال ضد پلاسمینوژن انسانی a۵e۱۰ ,a۴d۱۰ و a۳b۲ بر سیستم فیبرینولیز

چکیده   سابقه و هدف   اصلی ترین ترکیب سیستم فیبرینولیز، پیش آنزیم پلاسمینوژن می باشد که توسط فعال کننده های مختلفی به فرم فعال خود یعنی آنزیم پلاسمین تبدیل شده و نقش حیاتی خود را که همانا لیز لخته های فیبرینی است ایفا می کند. نخستین آنتی بادی منوکلونال ضد پلاسمینوژن انسانی در سال 1982 توسط پلوپلیس تهیه و اثر آن مطالعه شد. از آن زمان تاکنون محققین متعددی در نقاط مختلف دنیا به تهیه و مطالعه آنتی ...

متن کامل

مقایسه تأثیر وضعیت طاق باز و دمر بر وضعیت تنفسی نوزادان نارس مبتلا به سندرم دیسترس تنفسی حاد تحت درمان با پروتکل Insure

کچ ی هد پ ی ش مز ی هن ه و فد : ساسا د مردنس رد نامرد ي سفنت سرتس ي ظنت نادازون داح ي سکا لدابت م ي و نژ د ي سکا ي د هدوب نبرک تسا طسوت هک کبس اـه ي ناـمرد ي فلتخم ي هلمجزا لکتورپ INSURE ماجنا م ي دوش ا اذل . ي هعلاطم ن فدهاب اقم ي هس عضو ي ت اه ي ندب ي عضو رب رمد و زاب قاط ي سفنت ت ي هـب لاتـبم سراـن نادازون ردنس د م ي سفنت سرتس ي لکتورپ اب نامرد تحت داح INSURE ماجنا درگ ...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید


عنوان ژورنال:
فصلنامه پژوهشی خون

جلد ۳، شماره ۳، صفحات ۲۲۱-۲۳۲

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023